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分享!植物elisa檢測試劑盒的實驗步驟和注意事項

發布時間:2022-12-27   點擊次數:453次
  在植物elisa檢測試劑盒檢測中除了包被外,一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調加樣量的準確性,例如規定為加樣一滴。此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應力求準確。標本和結合物的稀釋液應按規定配制。加樣時應將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現氣泡。
 
  植物elisa檢測試劑盒的實驗操作步驟:
  1、把試劑混勻,切記實驗時不要加理大量含有泡沫的液體,避免實驗產生誤差。
  2、跟數據測樣決定板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
  3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔 加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
  4、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
  5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
  6、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
  7、每孔加入底物各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。一定要避免光照。
  8、取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
  9、在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
  操作注意事項:
  1、試劑應按標簽說明儲存,使用前恢復到室溫.稀稀過后的標準品應丟棄;
  2、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存;
  3、用干凈的塑料容器配置洗滌液,用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品;
  4、洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水;
  5、底物A應揮發避免長時間打開蓋,底物B對光敏感避免長時間暴露于光下;
  6、加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
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